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ZEISS Apotome 3 형광 Widefield 현미경의 Optical Sectioning

ZEISS Apotome 3는 초점이 맞지 않는 빛을 최소화하여 효율적인 Optical sectioning을 가능하게 합니다. 기존 현미경 작동법과 다르지 않아, 두꺼운 샘플에서도 쉽게 선명한 이미지와 3D 렌더링을 만들 수 있습니다. Apotome Plus로 한 단계 더 나아간다면 widefield 현미경으로도 confocal 이미징에 버금가는 품질의 이미지를 얻을 수 있을 거예요!

Structured Illumination 덕분에 신뢰할 수 있는 Optical sections
Peer-review로 검증 받은 알고리즘을 통한 Linear Approaches
최대 180 nm 해상도의 3D 구조 분석

  
      ZEISS Apotome 3 with Apotome Plus
      
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Cos7 cells (nuclei stained with Hoechst, tubulin with Alexa 488 and Phalloidin with Alexa 568) imaged with Plan Apochromat 63x/1.4.

다양한 실험 조건에서도

신뢰할 수 있는 Optical Sections

Apotome 3는 기존 형광 widefield 현미경의 axial resolution을 크게 향상시켜, 두꺼운 샘플에서도 3D 렌더링이 가능한 optical sections을 생성할 수 있습니다. 서로 다른 형상의 세 가지 grid가 각 목적에 가장 적합한 해상도를 제공합니다. 이상적인 structured illumination 구조가 자동으로 선택되어 high-contrast optical sections 생성이 보장되어 실험 자체에 더욱 집중할 수 있습니다.

_{Caption: Cos7 cells (nuclei stained with Hoechst, tubulin with Alexa 488 and Phalloidin with Alexa 568) imaged with Plan Apochromat 63x/1.4.}

Cortical neurons (left: Widefield; right: Apotome 3). Courtesy of L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Germany.

Peer-review 기반의 알고리즘

진정한 Optical Sections을 위한 Linear Approaches

순수 소프트웨어, AI 기반의 기법은 샘플에 대한 사전 지식이 필요하거나 peer-review를 거치지 않은 복잡한 알고리즘에 의존합니다. 연구자는 이러한 black-box 솔루션이 이미지를 "향상"시킬 때 정보를 변형하거나 위조하지 않는다는 것을 신뢰해야 합니다. ZEISS Apotome 3는 structured illumination의 정보와 문서화된 알고리즘을 기반으로 신뢰할 수 있는 선명한 optical sections을 생성합니다.

^{Caption: Cortical neurons (left: Widefield; right: Apotome 3). Courtesy of L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Germany.}

35 μm sagittal section of adult mouse brain, imaged with ZEISS Axio Observer and ZEISS Apotome, processed with Apotome Plus. Sample courtesy of University of California, Davis / NIH NeuroMab Facility. — Sample courtesy of University of California, Davis / NIH NeuroMab Facility.

Sample courtesy of University of California, Davis / NIH NeuroMab Facility.

Confocal에 버금가는 이미징

180 nm 해상도 with Apotome Plus

Widefield 현미경으로는 볼 수 없었던 디테일을 확인하세요. Apotome Plus를 사용하면 최대 180 nm의 lateral resolution으로 구조 정보를 얻을 수 있습니다. Structured illumination과 최첨단 이미지 프로세싱의 조합으로 신호 대 잡음비(SNR)와 x/y/z 해상도가 크게 향상됩니다.

^{Caption: 35 μm sagittal section of adult mouse brain, imaged with ZEISS Axio Observer and ZEISS Apotome, processed with Apotome Plus. Sample courtesy of University of California, Davis / NIH NeuroMab Facility.}

자유로운 광원과 염료 선택

기술의 한계가 아닌 여러분의 결정

실험의 복잡성과 조건은 점점 까다로워집니다. 그렇기에 적응력이 뛰어난 장비가 필요한 것이죠. Metal halide 램프, 경제적인 백색광 LED, 또는 gentle multi-color 광원 ZEISS Viluma와 함께 Apotome 3를 사용할 수 있습니다. DAPI, Alexa488, Rhodamin, Cy5 또는 GFP와 mCherry와 같은 vital dye 등 어떤 염료로 작업하든 Apotome 3는 형광체와 광원에 맞게 조정되어 여러분이 기대하는 선명하고 밝은 이미지를 촬영할 수 있습니다.

다양한 구성 요소 옵션

Apotome 3와 연구에 필요한 액세서리를 결합하여 현미경을 맞춤화하세요

현미경
- Axio Observer series (inverted research microscope)
- Axio Imager 2 series (upright research microscope)
- Axio Zoom.V16 (zoom microscope)
- Simple upgrading of existing systems
추천 대물렌즈
- C-Apochromat
- Plan-Apochromat
- EC Plan-Neofluar
조명 (광원)
- Viluma 5/7/9 (LED)
- Xylis LED (white light LED)
- HBO (mercury vapor lamp)
- HXP 120 C (metal halide)
카메라
- Monochrome, low-noise ZEISS Axiocam camera models
- Selected 3rd-party cameras

A: Widefield image. B – D: Raw images acquired with different grid positions. E: Resulting image; out-of-focus light is efficiently removed by the structured illumination.

Apotome 3 작동 원리

Apotome 3는 grid를 사용하여 intensity의 차이를 기반으로 패턴을 생성합니다. 샘플의 특정 영역에 초점이 맞지 않는 빛이 존재하면 grid가 보이지 않게 됩니다. 반면 grid 위치에서 형광이 획득되면 grid는 다음 위치로 이동하게 됩니다. 이러한 원리를 통해 대비와 해상도가 더 높은 진정한 optical section이 계산됩니다.

ZEISS Apotome 3 활용 사례

Cortical neurons stained for DNA, microtubules and microtubule-associated proteins. Courtesy of L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Germany.
Transgenic zebrafish larvae at 4 days post fertilization staining for: Glial fibrillary acidic protein, acetylated Tubulin, GFP and DNA. Embedded in 1.2% low melt agarose. Courtesy of H. Reuter, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Germany.
Sagittal section of adult mouse brain, imaged with ZEISS Axio Observer and ZEISS Apotome, processed with Apotome Plus. Sample courtesy of University of California, Davis / NIH NeuroMab Facility.
Bovine pulmonal arterial endothelial (BPAE) cells having nuclei stained with DAPI, F-actin with Alexa 488 phalloidin and mitochondria with MitoTracker Red CMXRos. Compared to the widefield image, Apotome removes out of focus light creating a crisp optical section. Apotome Plus further improves image quality and resolution resolving even finer structures.

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With multiple systems optimized for cleared tissues, find the right technology that balances sample size and the level of detail you wish to resolve.

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ZEISS Apotome 3

Optical sectioning in fluorescence imaging for your widefield microscope

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ZEISS Apotome 3 - Flyer

Hardware-based, Quantitative Optical Sectioning with Well Documented Algorithms

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